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教育部高中生物科學資優生培育計畫

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教育部高中生物科學資優生培育計畫 高雄區 微生物學實驗 學生： 學校： 授課教師：楊文仁 老師 國立高雄大學 生命科學系 1 實驗一、噬菌體效價測定 一、概述 1917 年法國科學家狄艾勒(d’ Herelle)發現病毒除非在消耗活細菌的情 況之下，否則不能複製；因此稱之為噬菌體(bacteriophage, phage)，並提供 了檢測此等「不可見」之病原的方法，其中被廣泛使用且效果最佳者為「斑 點測定法(plaque assay)」 。使用固態培養基培養細菌菌地(lawn of bacteria)與 噬菌體，能藉由噬菌斑計數(plaque counts)的方法較準確的計算樣品中噬菌 體的數量。此方法的理論基礎是：每一個噬菌體在宿主細菌的菌地上都能 形成一個清晰容易區別的噬菌斑，噬菌斑的數目與加入的噬菌體稀釋度成 反比，因此噬菌體的效價可以根據斑點形成單位(plaque forming units, pfu) 來推算。此方法所測到的病毒為具有感染細菌能力的活病毒。 微生物的接種培養過程必需在無菌環境下操作以避免雜菌的汙染，通常 在無菌操作台(laminar flow)或無菌室內接種細菌，與任何定性、定量分析…

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